最近，发表于CELL上的一篇文章“Regulation of T Cell Receptor Signaling by DENND1B inTH2 Cells andAllergic Disease”阐述了DENN1B（与哮喘密切相关的基因）在过敏反应中起着重要作用。

其研究方法简单明了，论证思路环环相扣，拥有了优质文章所应该具备的所有特点。

DENND1B

DENN，编码一段400个氨基酸大小的蛋白多肽，是在所有真核细胞中十分保守的一个蛋白结构域。他和Rab家族成员（GTP酶）相互作用，作为这些GTP酶的鸟嘌呤转移因子（GEF）。

DENND1A和DENND1B，均为Rab35-GTPase的GEF，而DENND1C还兼任Rab13-GTPase的激活因子。他们均含有DENN结构域，执行着不同的细胞功能。据报导，DENND1B突变，和“慢性空洞性肺曲菌病”发生发展有关。除此之外，DENND1B还和“儿童哮喘”有关（有较广泛的科学意义）。然而DENND1B其具体的致病机制并不清楚（存在科学问题）。

调节性T细胞

研究人员利用基因敲出技术敲出了小鼠的DENND1B基因。检测发现，DENND1B敲除小鼠在5周龄-7月龄阶段，免疫细胞数目和组成未曾发生变化，却在7月龄以后脾脏和淋巴结中的调节性/记忆性T细胞数目发生改变。表达DENND1B的DC细胞变化不大，且抗原呈递能力不受影响。祖T细胞细胞数量，细胞分化能力也没有显著变化。

然而，当研究人员将目光聚集到调节性T细胞（Th细胞）时，研究人员发现TH2细胞中炎性因子因子IL-4、IL-5、IL-13合成和分泌量上升。

此外，DENND1B敲除后，可以延迟激活细胞表面TCR的下调。TCR介导的下游信号通路增强。

并且，DENND1B敲除后，抗原（TNP-OVA）处理会导致淋巴结增大，支气管和肺部组织中各类炎性细胞数目发生上调，抗体含量和炎性因子IL-4、IL-5、IL-13发生上调。

人类中，DENND1B基因C/C（rs2786098）的人群，同样也存在TH2细胞炎性因子表达上调，TCR下调延迟的现象。且炎性因子的表达与DENND1B成正比。

可见，从细胞、动物、临床三个方面看，DENND1B缺失，上调TH2免疫调节功能，导致过敏反应的产生。

AP-2a、Rab-35

DENND1B到底是通过什么方式影响Th2细胞的呢？研究人员发现，当敲减AP-2a或Rab-35后，Th2细胞同样发生了炎性因子表达上升，TCR下调延迟等现象。

免疫沉淀实验发现，DENND1B可以和Ap-2a以及Rab-35结合，且TCR激活后，DENND1B和Rab-35结合量更多。可见DENND1B是通过和AP-2a以及Rab-35调节Th2细胞炎性因子表达以及TCR功能的。

严谨的科学论证逻辑

研究人员从现有研究基础出发，在DENND1B与哮喘密切相关的前提下，深入研究了DENND1B在过敏反应中的作用机制。

首先构建基因敲除小鼠，基因敲除所带来的免疫系统，表型上的变化；

通过各类细胞的比较和多种方法的使用，发现可能的作用途径；并能在动物水平和临床水平，多维度验证。

难能可贵的是，又从分子水平出发，继续研究了DENND1B的作用方式（大文章都是憋出来的），揭示了DENND1B具体的互作机制。

本篇文章中主要使用了ELISA、流式分析、qRT-PCR、IP、WB、质粒构建等方法，算有点技术难度的也就是敲除小鼠的构建。重点是其研究思路和逻辑结构——严谨而科学，步步推理，步步验证，着重于解决与临床有关的重大科学问题。这和我们国自然标书撰写的思路是完全一致的：具有有广泛意义的科学问题，在方法上实用>先进，能说明科学问题。逻辑清楚，论证过程圆满。

因此，诞生了这篇影响因子32.24的Paper。完全合理。